Mikroskop pendarfluor ialah sejenis mikroskop optik yang menggunakan sumber cahaya berintensiti tinggi untuk menerangi spesimen dan merangsang fluorokrom dalam sampel. Pencahayaan spesimen biasanya dilakukan dengan sumber cahaya yang memancarkan cahaya ultraungu. Ia digunakan secara meluas dalam bidang biologi, perubatan dan perindustrian.
Bagaimanakah mikroskop pendarfluor berfungsi?
Mikroskop pendarfluor menggunakan lampu merkuri atau xenon untuk menghasilkan cahaya ultraungu. Cahaya masuk ke dalam mikroskop dan mengenai cermin dichroic — cermin yang memantulkan satu julat panjang gelombang dan membenarkan julat lain melaluinya. Cermin dichroic memantulkan cahaya ultraungu sehingga spesimen. Sesetengah spesimen berpendar secara semula jadi di bawah cahaya ultraungu kerana ia mengandungi bahan pendarfluor seperti klorofil. Jika spesimen yang akan dilihat tidak berpendarfluor secara semula jadi, ia boleh diwarnakan dengan pewarna pendarfluor yang dipanggil fluorochromes.
Apakah yang terdiri daripada mikroskop pendarfluor?
1. Sumber Cahaya
Sumber cahaya yang paling biasa ialah merkuri, xenon, dan LED. Merkuri memberikan kualiti cahaya terbaik untuk mikroskop pendarfluor. LED menjadi lebih popular kerana ia lebih murah daripada sumber lain dan ia menggunakan lebih sedikit kuasa.
| Lampu Merkuri | Lampu Xenon | LED | |
| Panjang Gelombang Cahaya yang Dipancarkan | 350-370 nm | 400nm～ 450nm | 400-700 nm |
| seumur hidup(jam) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| Kelebihan | 1. Cahaya Intensiti Tinggi, Sumber Cahaya Paling Biasa. 2. Ia memancarkan ultraungu yang kuat dan biru-ungu untuk merangsang semua jenis fluorofor. 3. Imej terang dan berwarna-warni. | 1. Keamatan spektrum adalah stabil. 2. Keamatan spektrum yang kuat dalam inframerah dan pertengahan inframerah. | 1. Mudah diganti. 2. Tidak perlu memanaskan badan. 3. Boleh dihidupkan dan dimatikan serta-merta. 4. Kawal keamatan sumber cahaya. |
| Keburukan | 1. Seumur Hidup Singkat. 2. Masa memanaskan badan yang lama. | 1. Kotak kuasa DC voltan rendah khas diperlukan untuk haba berlebihan. 2. Lebih Mahal daripada Lampu Mercury | 1. Cahaya UV lebih lemah daripada lampu merkuri. 2.Setiap panjang gelombang cahaya memerlukan LED yang berasingan kerana lebar jalur sempit yang dipancarkan. |
Lampiran Pendarfluor Merkuri
Lampiran Pendarfluor LED
2. Penapis Pengujaan
Penapis pengujaan adalah penting untuk operasi mikroskop pendarfluor. Ia melepasi cahaya dengan panjang gelombang yang lebih pendek, yang boleh diserap oleh pewarna pendarfluor. Selain itu, ia menyekat sumber cahaya menarik yang lain.
Penapis Pengujaan(B,G,U,V)
3. Cermin Dichroic
Cermin dichroic ialah sejenis penapis optik yang memantulkan cahaya pada panjang gelombang tertentu sambil menghantar yang lain. Ia digunakan dalam mikroskop pendarfluor untuk memisahkan pengujaan dan panjang gelombang pancaran.
4. Penapis Pelepasan
Penapis pelepasan hanya melepasi panjang gelombang yang dipancarkan oleh fluorophore dan menyekat semua cahaya yang tidak diingini di luar jalur ini - terutamanya panjang gelombang pengujaan.
5. Pewarna pendarfluor
Pewarna pendarfluor ialah sebatian organik yang mempunyai sifat pendarfluor, yang dengannya ia boleh membentuk imej pendarfluor dengan memancarkan cahaya hijau yang boleh dilihat dengan sangat kontras selepas teruja dengan cahaya ultraviolet yang sangat menerangi. Pewarna pendarfluor yang biasa digunakan ialah; DAPI (49,6-diamidino-2-phenylindole), oren acridine, auramine-rhodamine, Alexa Fluors atau DyLight 488.
Berapa banyak jenis mikroskop pendarfluor?
1. Mikroskop Epifluoresensi Tegak:
Ia adalah jenis mikroskop pendarfluor yang paling biasa. Pengujaan fluorophore dan pengesanan pendarfluor dilakukan melalui laluan cahaya yang sama (iaitu melalui objektif). Majoriti mikroskop pendarfluor, terutamanya yang digunakan dalam sains hayat, adalah daripada reka bentuk epifluoresensi.
Mikroskop Biologi Pendarfluor Penyelidikan BS-2081F
2. Mikroskop Pendarfluor Konfokal:
Mikroskop Pendarfluor Konfokal: Mikroskop pendarfluor jenis ini menggabungkan pengimbasan laser dengan pencahayaan pendarfluor untuk menghasilkan imej. Ia boleh digunakan dalam pelbagai aplikasi, seperti mengkaji sel dan tisu, mengesan protein dan bahan lain dalam sel, dan mengukur ketebalan bahan.
Mikroskop Biologi Pendarfluor Penyelidikan BS-2081F
3. Mikroskop Pendarfluor Terbalik
Sumber cahaya dan pemeluwap mikroskop jenis ini terletak di bahagian atas, menghadap ke bawah. Sudut pencahayaan mestilah pada 90 darjah berkenaan dengan permukaan spesimen yang sedang diperiksa.
Mikroskop Pendarfluor Terbalik BS-2095F
Apakah kelebihan dan kekurangan mikroskop pendarfluor?
Kelebihan:
- Membolehkan pemerhatian sel dalam organisma hidup tanpa merosakkannya
- Menyediakan imej resolusi tinggi dengan warna yang tepat
- Membolehkan untuk mengkaji proses hidup dalam sel
- Digunakan untuk mengenal pasti pelbagai jenis molekul di dalam sel, seperti protein atau asid nukleik.
Kelemahan:
-Ia hanya membenarkan pemerhatian struktur tertentu di dalam sel yang ditandakan dengan pewarna pendarfluor.
-Pemutihan foto akibat pengujaan elektron semasa proses pendarfluor boleh menjejaskan molekul reaktif pewarna pendarfluor. Akibatnya, pewarna reaktif mungkin kehilangan sifat kimia keamatan pelepasan pendarfluor.
-Sel mudah terdedah kepada kesan fototoksik selepas diwarnakan dengan pewarna pendarfluor, kerana molekul fluorofor menyerap foton tenaga tinggi daripada cahaya panjang gelombang pendek.
Apakah aplikasi mikroskop pendarfluor?
Mikroskop pendarfluor digunakan secara meluas dalam pelbagai bidang penyelidikan dan aplikasi termasuk biokimia, biologi sel, mikrobiologi, imunologi, dan perubatan.
1. Dalam bidang biologi, mikroskop pendarfluor membolehkan pengecaman yang tepat dan terperinci bagi komponen dan aktiviti selular dan submikroskopik selular dengan bantuan pelabelan pewarna pendarfluor.
2. Dalam bidang perubatan, mikroskop pendarfluor boleh menggunakan reagen pendarfluor untuk mengesan kehadiran dan pengedaran bakteria dan virus, atau untuk membantu dalam pelabelan sasaran pembedahan untuk memudahkan pembedahan.
3. Dalam bidang mineralogi, mikroskop pendarfluor sering digunakan untuk mengkaji bahan dengan sifat pendarfluor spontan, seperti asfalt, petroleum, arang batu, graphene oksida dan mineral lain.
4. Dalam sains bahan, mikroskop pendarfluor boleh digunakan dalam industri tekstil atau industri kertas untuk menganalisis bahan berasaskan gentian.
Masa siaran: Mac-14-2023